這些會導(dǎo)致轉(zhuǎn)基因探針法PCR試劑盒變質(zhì)的因素您知道嗎?
點擊次數(shù):666 更新時間:2023-01-16
轉(zhuǎn)基因探針法PCR試劑盒具有敏感性高、特異性強(qiáng)、快速等特點,目前廣泛應(yīng)用于農(nóng)獸藥、真菌殘留檢測,該方法從加樣、洗板、顯色到讀數(shù)步驟繁多,其中任何一步控制不好都可能影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
今天咱們來了解下會導(dǎo)致轉(zhuǎn)基因探針法PCR試劑盒變質(zhì)的因素,希望大家多多注意:
1、方法學(xué)的影響:測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法,其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的競爭等因素的影響,結(jié)果重復(fù)性較差,質(zhì)量較難控制。
2、樣本因素:標(biāo)本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素,者包括類風(fēng)濕因子、補體、異嗜性抗體、自身抗體等,后者包括標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時間過長、標(biāo)本凝固不全、冷凍標(biāo)本的反復(fù)凍融等。
3、試劑因素:不同批次的試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量*一致,即使是通過批批檢的項目其檢測結(jié)果也存在差異,因此必須選擇和訂購長批號的試劑,并保證保存條件。嚴(yán)格執(zhí)行這標(biāo)準(zhǔn)可以避免因試劑批號改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評估試劑的復(fù)雜過程,并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性;對于效期短、使用率低的試劑,應(yīng)當(dāng)小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,避免反復(fù)凍融造成試劑的失效。
4、操作因素:操作步驟復(fù)雜,操作不當(dāng)將引起較大的誤差。加樣、溫育、洗滌、顯色、比色。
5、灰區(qū)的設(shè)置:通常情況下,定性實驗以“陽性”和“陰性”來報告結(jié)果,兩者間有一條分界線被稱為“陽性判斷值”(cut-offvalue,CO值),這是定性免疫測定結(jié)果報告的依據(jù)。