FN elisa檢測(cè)試劑盒操作步驟和注意事項(xiàng) |
點(diǎn)擊次數(shù):737 發(fā)布時(shí)間:2019/1/4 |
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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 |
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FN elisa檢測(cè)試劑盒操作步驟: 1、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。 2、溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。 3、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用 4、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此 重復(fù)5次,拍干。 5、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。 6、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色 10 分鐘. 7、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。 8、測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。 FN elisa檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng): 1.嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。 2.洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。 3.消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。 4.底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。 5.避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。 6.在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。 7.平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。 8.任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。 9.不能使用過(guò)期產(chǎn)品。 10.如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。 |
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