曲霉屬通用PCR試劑盒所用試劑的配制方法分享
點(diǎn)擊次數(shù)：490 更新時(shí)間：2022-02-15
曲霉屬通用PCR試劑盒適用于反應(yīng)后去除引物、酶、礦物油、甘油、鹽等雜質(zhì)；也同樣適用于酶切、連接、磷酸化、補(bǔ)平或切平、隨機(jī)引物等反應(yīng)后的DNA純化，純化所得DNA可直接用于酶切、連接、轉(zhuǎn)化細(xì)菌、測(cè)序、PCR、雜交等后續(xù)操作。
曲霉屬通用PCR試劑盒采用*的酶系統(tǒng)，樣品無(wú)需裂解，無(wú)需DNA提取和純化，可以直接進(jìn)行PCR反應(yīng)，適用于大規(guī)模樣品的高通量PCR篩選，也適用于其他如基因分型，轉(zhuǎn)基因的篩選，基因敲除分析和測(cè)序等應(yīng)用，無(wú)需DNA提取與純化過(guò)程，樣品直接進(jìn)行PCR，能夠耐受未純化樣本中存在的多種PCR抑制劑，每次使用前請(qǐng)輕輕搖勻后使用。PCR產(chǎn)物中含有的納米材料一般不影響電泳等后續(xù)操作。
下面要為大家介紹的是曲霉屬通用PCR試劑盒所用試劑的配制方法：
1、標(biāo)準(zhǔn)品
?。?）從試劑盒中取出一支標(biāo)準(zhǔn)品，于6000-10000rpm離心30秒。用1ml樣本稀釋液溶解，并用吸頭對(duì)準(zhǔn)凍存管底部反復(fù)吸打5次以助溶解，充分混勻得到標(biāo)準(zhǔn)品S7，放置備用。
?。?）取7個(gè)1.5ml離心管(S0-S6)依次排列，各加入250μl樣本稀釋液。吸取250μl標(biāo)準(zhǔn)品S7到*個(gè)離心管中(S6)，輕輕吹打混勻。從S6中吸取250μl到第二個(gè)EP管中(S5)，輕輕吹打混勻。以此類推進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)品的倍比稀釋。S0為樣本稀釋液。
2、洗液工作液濃洗滌液按1:25倍用去離子水進(jìn)行稀釋。例如用量筒量取240ml去離子水，倒入燒杯或其他潔凈容器中，再量取10ml濃洗滌液，均勻加入，攪拌混勻，在臨用前配妥。濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
3、生物素標(biāo)記抗體工作液生物素標(biāo)記抗體液按1:100倍用生物素標(biāo)記抗體稀釋液進(jìn)行稀釋。如10μl生物素標(biāo)記抗體加990μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液，輕輕混勻，在臨用qian10分鐘內(nèi)配妥。
4、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素按1:100倍用辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液進(jìn)行稀釋。如10μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液，輕輕混勻，在使用前十分鐘內(nèi)配妥。
