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更新時(shí)間:2018-11-03
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
人肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 | Human pulmonary artery smooth muscle cell culture medium | 100mL |
人肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
人肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
1 kit (for up to 20 preparations)Genopure Plasmid Midi Kit
1 kit (for 200 reactions of 50 µl final reaction volume)High Fidelity PCR Master
1 kit (up to 50 isolations)High Pure FFPET RNA Isolation Kit
1 kit (50 isolations)High Pure miRNA Isolation Kit
1 kit (up to 200 purifications)High Pure PCR Cleanup Micro Ki
1 kit (up to 50 purifications)High Pure PCR Cleanup Micro Ki
1 kit (up to 40 isolations)High Pure Viral NA Large Volum
1 kit (250 purifications)HP PCR Product Purification Ki
人肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum短短芽胞桿菌 Brevibacillus brevis
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus
人腺細(xì)胞厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
人膀胱平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基人小氣道上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基
中國(guó)臺(tái)灣根霉 Rhizopus formosensis清酒酵母 Saccharomyces sake
蘇云金芽胞桿菌阿萊亞種 Bacillus thuringiensis subsp. alesti大鼠胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基
美味側(cè)耳 Pleurotus sapidus嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum海生嗜鹽球菌 Marinococcus halophilus
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae黃色籃狀菌
RK1(大鼠腎細(xì)胞)膠質(zhì)芽胞桿菌 Bacillus mucilaginosus
泡盛曲霉 Aspergillus awamori日本根霉 Rhizopus japonicus
熱帶假絲酵母 Candida tropicalisSUP-B15(人Ph+急淋白血病細(xì)胞系)
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng),詳細(xì)人肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基說明書!
產(chǎn)品名稱 | 6-10B, 人鼻咽癌細(xì)胞系 |
英文名稱 | 6-10B, nasopharyngeal carcinoma cell lines |
規(guī)格 | 5×105cells/瓶 |
6-10B, 人鼻咽癌細(xì)胞系功能:
(1) 血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
(2) 表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
(3) 與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
生理變化:
(1) 主動(dòng)脈硬化。
(2) 主動(dòng)脈瘤
(3) 主動(dòng)脈鈣化。
基本特性:
(1) 組織來源于正常大鼠大動(dòng)脈組織。
(2) 鑒定:肌動(dòng)蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
(3) 原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
(4) 每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù):>5×105 cells/1ml。
(5) 肌動(dòng)蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
(6) 不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
1.56-100 ng/mL人多功能蛋白聚糖核心蛋白(Versican core protein)ELISA試劑盒
1.56-100 ng/mLELISA Kit for Human Versican core protein
31.2-2000 pg/mL人視錐蛋白樣蛋白1(VSNL1)ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mLELISA Kit for Human Visinin-like protein 1
0.156-10 ng/mL人血管非炎性蛋白1(VNN1)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mLELISA Kit for Human Pantetheinase
7.8-500 ng/mL人含V-set域T細(xì)胞激活抑制因子ELISA試劑盒
7.8-500 ng/mLELISA Kit for Human V-set domain-containing T-cell activation inhibitor 1
6-10B, 人鼻咽癌細(xì)胞系布氏肉湯/Brucella Broth用于彎桿菌增菌肉湯和布氏瓊脂的制備250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
煌綠瓊脂/亮綠瓊脂/Brilltant Green Agar沙門氏菌分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
雞鼻炎合成培養(yǎng)基1萬毫升/袋國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
假單胞分離肉湯/Pseudomonas Isolation Broth假單胞菌群增菌培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
堿性瓊脂平板/Alkaline Agar用于分離霍亂弧菌250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂/YPD瓊脂/YEPD瓊脂/Yeast Extract Peptone Dextrose Agar生物制品和蜜漿制劑酵母菌總數(shù)測(cè)定250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
解脲支原體快速培養(yǎng)基/溶脲支原體快速培養(yǎng)基/UU培養(yǎng)基/UU MediumBR1支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
氨酸脫羧酶對(duì)照發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
菌種保存培養(yǎng)基/Strain Store Medium常用細(xì)菌斜面?zhèn)鞔?50克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人結(jié)腸氟尿嘧啶耐藥株英文名稱:HCT-8/FU
NEC(人食管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
中期因子(MK)重組蛋白英文名稱:Recombinant Midkine (MK)
谷氨酸脫羧酶2(GAD2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Glutamate Decarboxylase 2, Acid (GAD2)
6-10B, 人鼻咽癌細(xì)胞系運(yùn)輸和保存:
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
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