在线观看免费视频伊人网-亚洲人妻一区二区三区av-免费观看国外美女啪啪动感视频-国产精品久久久18成人

產品列表PRODUCTS LIST

逆轉錄酶

簡要描述:

逆轉錄酶公司正在出售的產品:人乳腺癌細胞-紅色標記 磷化核糖體S6K2蛋白激封閉多肽 弗朗西斯菌通用PCR檢測試劑盒 大鼠血小板反應蛋白/敏感蛋白1(TSP-1)ELISA檢測試劑盒 血清總鐵結合能力活性比色法檢測試劑盒 阿拉斯加鞘氨醇盒菌 磷化活化轉錄因子1抗體

更新時間:2024-01-15

分享到: 1
在線留言
逆轉錄酶

商品屬性:

產品名稱

規(guī)格

貨號

逆轉錄酶

2000U  200u/ul

A-Tq3033

逆轉錄酶

10000U  200u/ul

A-Tq3033

6.png


5.png

PCR 反應需要使用哪些試劑和設備?

試劑:
模板DNA:PCR反應需要模板DNA,如從細胞、組織、血液中提取DNA等;引物:PCR反應的兩個引物,分別與模板DNA的兩端配對擴增所需的特定區(qū)域,引物也可以合成為TA克隆等過程中使用到的引物;dNTPs:PCR反應中需要四種dNTPs,包括脫氧腺苷酸(dATP)、脫氧胸苷酸(dCTP)、脫氧鳥苷酸(dGTP)、脫氧胞嘧啶酸(dTTP),用于細胞分裂、DNA合成等生物學過程,用于PCR擴增的模板DNA鏈的延伸和擴增;Taq DNA聚合酶:PCR反應需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,還有一些其他種類的聚合酶如PFU、Phusion等,用于擴增DNA鏈;PCR buffer溶液:對PCR反應具有緩沖作用,調節(jié)反應pH,硫代硫酸氫鹽SDS、小分子有機化合物如甲醛,可增強PCR反應特異性,從而提高反應效率;酶切體系:PCR擴增往往涉及到重組、構建和測序等等實驗步驟,常常需要進行酶切操作。MARK:一種分子量標準,用來判別DNA片段大小的工具。DNA純化試劑盒:用于純化PCR反應產物;
設備:
PCR儀:用于控制反應溫度,保證PCR反應時不同溫度環(huán)節(jié)的嚴格控制;電泳槽:用于分離PCR擴增產物;核酸提取儀:從組織樣本中全自動提取核酸。  這些試劑和設備在PCR分子生物學技術中均是,只有在有序齊全的基礎上,才能進行PCR反應并得出準確結果。

PCR相關基礎實驗:

PCR反應基本步驟一般的聚合酶鏈式反應由20到35個循環(huán)組成,每個循環(huán)包括以下3個步驟:

一、變性:

利用高溫(93-98℃)使雙鏈DNA分離。高溫將連接兩條DNA鏈的氫鍵打斷。在第一個循環(huán)之前,通常加熱長一些時間以確保模板和引物分離,僅以單鏈形式存在。該步驟時間1-2分鐘,接下來PCR儀就控制溫度進入循環(huán)階段。

二、退火或稱接合,復性:

在DNA雙鏈分離后,降低溫度使得引物可以結合于單鏈DNA上。此階段的溫度通常低于引物熔點5℃。錯誤的退火溫度可能導致引物不與模板結合或者錯誤地結合。該步驟時間1-2分鐘。

三、延伸:

DNA聚合酶由降溫時結合上的引物開始沿著DNA鏈合成互補鏈。此階段的溫度依賴于DNA聚合酶。該步驟時間依賴于聚合酶以及需要合成的DNA片段長度。傳統(tǒng)的Taq估計合成1000bp/min、較新的Tbr(來自于嗜熱菌Thermus brockianus)約40秒、商業(yè)公司生產的融合型聚合酶僅需約10-15秒。

PCR反應條件優(yōu)化:

1、變性溫度和時間:

保證模板DNA解鏈是保證整個PCR擴增成功的關鍵。加熱90~95°C, 30~60s,再復雜的DNA 分子也可變性為單鏈。溫度過高或高溫持續(xù)時間過長,可對Taq酶活性和dNTP分子造成損害。

2、復性溫度和時間:

PCR擴增特異性取決于復性過程中引物與模板的結合。復性溫度越高,產物特異性越高。復性溫度越低,產物特異性越低。需根據引物的Tm值具體設定。

3、延伸溫度和時間:

一般位于Taq酶最適作用溫度70~75°C之間。引物小于16個核苷酸時,過高的延伸溫度不利于引物與模板的結合,可以緩慢升溫到70~75°C。延伸反應時間,可根據待擴增片段的長度而定,小于1kb, 1min足夠;大于1kb需加長延伸時間。Taq酶可根據1kb/min增加時間。這里需要注意,延伸時間過長可能出現非特異擴增。因此需要設置恰到好處的延伸時間。

4、循環(huán)數:

其他參數選定后,PCR循環(huán)次數主要取決于模板DNA的濃度。理論上說20?25次循環(huán)后,PCR產物的積累即可達到最大值,實際操作中由于每步反應的產率不可能達到100%,因此不管模板濃度是多少,20~30次是比較合理的循環(huán)次數。循環(huán)次數越多,非特異擴增增加。

公司正在出售的產品:

副流感病毒1型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

PC4,SFRS1互動蛋白1ELISA試劑盒 PSIP1免費代測試劑

人腺病毒B16型探針法熒光定量PCR試劑盒

大片吸蟲通用PCR檢測試劑盒直銷

-3ELISA試劑盒 PON3免費代測試劑

同病毒綿羊膿皰病毒PCR檢測試劑盒直銷

不動桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒

登革熱抗體ELISA試劑盒

鄰單胞菌通用PCR檢測試劑盒

犬鉤端螺旋體PCR檢測試劑盒

多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉移12ELISA試劑盒

淋病奈瑟菌染料法熒光定量PCR試劑盒

牡蠣皰疹病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒

泛核蛋白1ELISA試劑盒

木賊鐮刀菌探針法熒光定量PCR試劑盒

牛巨細胞病毒染料法熒光定量PCR試劑盒

芳基硫酯IELISA試劑盒

馬源性成分(Horse)核檢測試劑盒

牛巨細胞病毒探針法熒光定量PCR試劑盒

紡錘體蛋白1ELISA試劑盒

犬利什曼原蟲染料法熒光定量PCR試劑盒

木鼠布魯氏菌PCR檢測試劑盒

分揀連接蛋白12ELISA試劑盒

柯薩奇病毒A6型和A10PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)

木瓜PCR檢測試劑盒

封閉蛋白1ELISA試劑盒

禽杯狀病毒PCR檢測試劑盒直銷

牛結節(jié)性皮膚?。?/span>LSDVPCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)

鈣黏蛋白7ELISA試劑盒

鏈球菌屬通用PCR檢測試劑盒

馬杜拉分枝菌PCR檢測試劑盒說明書

人白細胞抗原DR(HLA-DR)檢測試劑盒elisa

輕型鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒

綿羊星狀病毒1型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

人因子Ⅲ(FⅢ)試劑盒ELISA

丙型肝炎病毒5型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

大片吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

α-防御4(NP-4)ELISA試劑盒

羊血吸蟲PCR檢測試劑盒

匙狀毛樣線蟲PCR檢測試劑盒

人白介2誘導的T細胞激(ITK)ELISA試劑盒

逆轉錄酶藍氏賈第鞭毛蟲A型探針法熒光定量PCR試劑盒

氣單胞菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒

人低密度脂蛋白(LDL)試劑盒 ELISA

犬諾瓦克病毒探針法熒光定量PCR試劑盒

 


大丰市| 冷水江市| 呈贡县| 疏附县| 福海县| 察雅县| 论坛| 池州市| 台前县| 宜兰市| 无锡市| 烟台市| 海门市| 宜黄县| 宜黄县| 怀来县| 南宫市| 大宁县| 德令哈市| 瓮安县| 中山市| 安陆市| 安陆市| 论坛| 皮山县| 鹤山市| 绩溪县| 福海县| 康平县| 静宁县| 恩施市| 彭阳县| 崇仁县| 叶城县| 肥东县| 灵宝市| 富宁县| 保亭| 陕西省| 景宁| 石首市|