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纖維素含量(CLL)試劑盒科研的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:孕激誘導(dǎo)阻斷因子抗體piwi樣1抗體激A抗體
更新時(shí)間:2022-01-27
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱:纖維素含量(CLL)試劑盒科研
規(guī)格:48樣 48樣 96樣
貨號(hào):AS250
檢測(cè)方法:可見(jiàn)分光光度法 微板法 微板法
產(chǎn)品分類:細(xì)胞壁代謝系列
貯存溫度:2~8℃。
本試劑盒保質(zhì)期:6個(gè)月。本產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。
GABRA1 G1氨基丁A型受體α1抗體 規(guī)格: 0.1mlTIMP-2 金屬組織抑制因子-2抗體 規(guī)格: 0.1ml
C6orf120 6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框120抗體 規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-human IgM/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml
eIF3A 真核翻譯起始因子3A抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-human sIgA/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格: 0.1ml
FPR3/Lipoxin A4 receptor 甲酰肽受體3抗體(脂氧A4受體) 規(guī)格: 0.2ml
NKB 神經(jīng)激肽B抗體 規(guī)格: 0.2ml
IDI1 異戊烯焦磷1抗體 規(guī)格: 0.2mlTSPAN9/NET-5 四分子交聯(lián)體9/四旋抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-CDK7 (Thr170) 磷化周期依賴性激7抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-TNIK(Ser769) 磷化TRAF2和NCK激相互作用抗體 規(guī)格: 0.1mlCellulase 纖維 1ml
phospho-FAK(Ser722) 磷化粘著斑激抗體 規(guī)格: 0.1ml
纖維素含量(CLL)試劑盒科研GRACE’S 昆蟲培養(yǎng)基 1/10升(劑)
胚胎干細(xì)胞(ES)基礎(chǔ)培養(yǎng)基 500毫升
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF)*培養(yǎng)基 500毫升
胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)生長(zhǎng)因子 5毫升
胚胎干細(xì)胞基質(zhì)膠溶液 10毫升
胚胎干細(xì)胞補(bǔ)充培養(yǎng)基 100毫升
人體胚胎干細(xì)胞條件培養(yǎng)基 100毫升
人體胚胎干細(xì)胞*培養(yǎng)基 100毫升
小鼠胚胎干細(xì)胞*培養(yǎng)基 100毫升
大鼠胚胎干細(xì)胞*培養(yǎng)基 100毫升
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。